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iTRAQ/ TMT定量蛋白质组
iTRAQ和TMT是分别由美国AB Sciex公司和Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术, 采用8种或18种同位素标签,通过特异性标记多肽的氨基酸基团, 一次上机可实现8种或18种不同样本中蛋白质的相对定量,是近年来定量蛋白质组学常用的高通量筛选技术。技术原理
iTRAQ和TMT原理类似,以TMT试剂为例,该试剂结构由报告基团、中性平衡基团和反应基团三部分组成。技术特征
1. 通量高,不受样本数目的限制
单次上机最多可以同时进行8个样品(iTRAQ)或18个样品(TMT)蛋白的鉴定和定量, 超过8个样品(iTRAQ)或18个样品(TMT)可以通过设置内参,形成搭桥,实现多次上机数据之间的比较,不受样本数目的限制。2. 定量准确,重复性高
不同样本标记之后混样,统一处理、上机,与非标记定量样本单独处理、上机相比, 减少了样本处理和上机造成的实验误差,提高了定量的准确性和重复性。3. 蛋白检测范围广
无物种特异性限制,理论上可用于所有物种。蛋白范围广,胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白、分泌蛋白等皆可检测。 蛋白丰度和分子质量跨度大,可检测出低丰度蛋白、强碱性蛋白、小于10KD或大于200KD的蛋白。技术路线
信息分析流程
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