常见问题

• Q1：Olink整板检测多少样本？每个panel检测多少蛋白？?

  产品	Explore?HT	Explore?384	Reveal	Target?96	Target?48
  检测蛋白数	5400+?	360+/panel?	1000+	92/panel	40+/panel
  检测panel?	-	Cardiometabolic Cardiometabolic II Inflammation Inflammation II Neurology Neurology II Oncology Oncology II	-	Cardiovascular II Cardiovascular III Cardiometabolic Immuno-Oncology Immune Response Neurology Neuro Exploratory Oncology II Oncology III Inflammation Metabolism Development Organ Damage Cell Regulation Mouse Exploratory	Cytokine Immune? Surveillance? Mouse?Cytokine?
  检测消耗体积/样?	2μL	1μL	4ul	1μL	1μL
  样本数量	172+20QC	88+8QC	86+10QC	88+8QC	40+8QC
  定量检测平台	NGS	NGS	NGS	qPCR	qPCR
  结果形式	NPX?	NPX?	NPX?	NPX?	NPX或pg/mL
  线性范围	fg-mg/mL?(10?logs)?

• Q2：Olink建议送样体积？

  考虑到运输及实验中的损耗，建议寄送样本体积40-80ul。

• Q3：Olink在检测样本数量大于等于2板时是否需要搭桥？桥接样本如何收费？桥接样本需要多少送样量？?

  需要搭桥，推荐8-16个桥接样本，由软件自动从第一板检测的所有样本中选择。搭桥样本正常收费。按照建议送样体积进行送样即可。 更详细的制备步骤请咨询当地销售

• Q4：是否可以使用福尔马林固定的样本进行Olink检测？

  Olink技术不能检测福尔马林固定的样本。

• Q5：样本中的聚乙二醇（PEG）会对检测和结果产生什么影响？

  少量添加PEG（最高可达2.5%）对样本分析没有太大问题，但可能会略微增加背景信号，因此建议添加一个仅包含纯缓冲液的空白样本作为对照。

• Q6：细胞和组织裂解液的最佳起始浓度是多少？

  建议细胞和组织裂解液中的总蛋白浓度范围在0.5?g/?L到1?g/?L之间。为了确定特定基质的最佳蛋白检测浓度，建议至少在两种不同的蛋白浓度下进行预实验。最重要的是，所有要一起分析的样本必须具有相同的起始浓度。

• Q7：Olink适用于哪些物种？

  目前Olink只有人和小鼠panel。其中小鼠适用于Target 48 Mouse Cytokine和Target 96 Mouse Exploratory，其余均为人的panel。?

• Q8：哪些样本类型可以用于Olink检测？

  Olink可以用于人的血浆和血清样本。其他样本类型，例如脑脊液，组织和细胞裂解液、外泌体、微透析液、支气管肺泡灌洗液、细胞培养基、滑膜液、脑脊液、尿液、唾液等也有相关经验，详情请咨询对应销售。

• Q9：使用Olink技术进行蛋白质组测序与传统DNA测序的主要区别是什么？

  Olink使用NGS（下一代测序）作为工具来测量样本中特定蛋白生物标志物的相对浓度。在样本和文库制备过程中，会产生具有独特序列的短DNA片段，每个蛋白生物标志物对应一个序列。测序后，特定DNA序列的计数（reads）数量与原始蛋白生物标志物的浓度成正比。?

• Q10：什么是内参？它们如何用于数据分析？内参是否收费？

  Olink Explore包含三种类型的内参，这些内参被加入到我们的检测中，用于监控整个流程的每一步。
  Incubation Control：是一种针对非人蛋白的PEA检测，用于监控所有步骤，并用于数据质量控制（QC）。
  Extension Control：是一种带有两个DNA寡核苷酸的抗体分子，因此它的两个DNA始终处于接近状态。这种对照用于监控延伸、文库制备和测序步骤，并用于数据标准化目的。?
  Extension Control：是一种合成的双链扩增子，用于监控文库制备和测序步骤，并用于数据质量控制。?
  内参不收费。

• Q11：Olink是否需要对样本进行随机化？?

  是的。对于所有Olink项目，都需要样本随机化。在纵向研究中，来自同一受试者在不同时间点收集的样本应全部包含在同一板中，以进一步减少数据中的变异。受试者应被分配，以使剩余的实验变量在板之间均匀分布。此类项目中，我们会根据Olink推荐软件帮您进行样本随机化。

• Q12：Olink是否需要技术重复？为什么？

  不需要。Olink平台无需技术重复的核心原因在于其创新的邻位延伸分析技术（PEA）与系统性优化设计。PEA采用双抗体探针特异性结合靶蛋白，通过DNA条形码杂交形成可定量信号，结合微流控技术实现超微量样本中上千种蛋白同步检测，单次检测即可达到传统方法多次重复的置信度。该技术通过三重保障降低重复需求：① 高特异性：双抗结合与DNA编码大幅减少非特异性信号，背景噪音较ELISA降低90%；② 标准化质控：预验证抗体对、自动化液体处理系统及内置质控参数（内参蛋白、阴性对照）确保批次一致性，ICC普遍>0.8；③ 临床级验证：在UK Biobank等大型队列中，单次检测数据即可满足临床研究要求，CV值<10%。这种"精准单次检测"模式突破了传统蛋白质组学依赖重复实验的瓶颈，使大规模样本的高通量分析效率提升10倍以上。?